山东省部分地区奶牛场布鲁氏菌病血清学调查天王球锦

近年来，畜间及人间布病有回升趋势。为了解当前山东省奶牛场的布病流行情况，从 4 个地区的 6 个规模化奶牛场，采集 1 736 份成母牛血清，采用虎红平板凝集试验（RBPT）、试管凝集试验（SAT）、间接酶联免疫吸附试验（ELISA）进行检测，为布病防控提供基础数据。

布鲁氏菌病（以下简称布病）是由布鲁氏菌引起的一种人兽共患传染病。在2003年公布的《一、二、三类动物疫病病种名录》中，我国将其列为二类动物疫病 [1]。牛、羊、猪、鹿等多种动物对其易感。人感染后严重影响生殖健康和生活质量，甚至丧失劳动能力 [2]，因此该病的防控具有重要的公共卫生意义。近年来，畜间及人间布病有回升趋势。为了解当前山东省奶牛场的布病流行情况，从 4 个地区的 6 个规模化奶牛场，采集 1 736 份成母牛血清，采用虎红平板凝集试验（RBPT）、试管凝集试验（SAT）、间接酶联免疫吸附试验（ELISA）进行检测，为布病防控提供基础数据。

1、检测材料

1.1 血清来源及背景

待检血清从山东省 4 个地区 6 个规模化奶牛场的成母牛群中采集，其中 5 个牛场的成母牛均免疫过布鲁氏菌 A19 疫苗（表 1）。

1.2检测试剂

布病虎红平板凝集试验抗原、试管凝集试验抗原、试管凝集试验阴阳性血清均购自中国疾病预防控制中心；酶联免疫吸附试验，使用 IDEXX 牛布鲁氏菌抗体检测试剂盒。

2、检测方法

布病抗体检测（虎红平板凝集试验、试管凝集试验），按照国家标准（GB/T186盒果藤46—2002）操作 [3]；酶联免疫吸附实验，按照 ELISA 试剂盒说明书操作。

3、检测结果对 1 736 份血清进行布病抗体检测。结果显示：奶牛群的布病抗体总阳性率为 11.12%；各奶牛场的检出阳性率差异较大，其中青岛奶牛场检出的阳性率**。3 种检测方法中，RBPT 检出的阳性**多，阳性检出率为 12.73%；ELISA 次之，阳性检出率为11.75%；SAT**少，阳性检出率为11.12%（表2、表盾蕨属3）。

4、分析与讨论

本次调查结果显示，山东省 6 个奶牛场的布病抗体总阳性率为 11.12%。这与 2014 年岳瑞超等 [1]从山东省济南市、青岛市两处奶牛场的抽样检测结果（10.05%）相比偏高。原因可能是山东省属于国布病管理管丝韭的一类地区，对奶畜原则上不免疫，而调查的这 6 家奶牛场中有 5 家进行过免疫，导致抗体阳性率偏高。

近年来，我国奶牛交易量逐渐增加，布病阳 性率呈上升趋势。2009—2011 年周继章等 [4] 调查全国部分省（区）动物布病流行情况，发现奶牛布病阳性率为 7.5%；2011—2013 年王基隆等 [5] 调查布病的总阳性率为 18.58%；2014 年韦明等 [6] 调查布病的总阳性率为 22.51%。以上数据说明，全国部分省（区）的布病发病率在逐年上升，流行情况比较严重。若在奶牛交易过程中未进行严格检疫，再加上消毒不严，感染牛很容易将细菌带入牛场，由此加大了布病感染与传播的风险。虽然未实施免疫奶牛场的布病抗体为阴性，但鉴于国内布病的疫情形势以及奶牛流通的加快，山东省的布病防控压力在逐步加大。

本次检测结果显示，山东省不同地区奶牛场之间的布病抗体阳性率差异较大。这可能与疫苗免疫时间的长短有关。理论上讲，A19 疫苗免疫 6个月后，大部分奶牛血清中的布病抗体效价应由阳性变为阴性，个别奶牛由于个体差异可能不产生抗体或者抗体阳性持续数间长，甚至长达 2 年。青岛奶牛场仅免疫 2 个月，因此抗体阳性率高；泰安 1 场和 3 场分别已免疫 6 个月或 7 个月，抗体水平下降，但阳性率仍受疫苗产生的抗体干扰；虽然菏泽奶牛场和枣庄奶牛场已分别免疫 1 年和 2年，理论上疫苗产生的抗体效价应该转阴，但由于个体差异，个别奶牛抗体效价仍是阳性。

目前，我国官方规定的布病检测方法为，先通过 RBPT 筛查，再以 SAT 对阳性样品进行确认长柄线蕨。RBPT操作简单、价格低廉、敏感性高，但特异性低，适合用于样品初筛。虽然目前的血清学检测方法较多，但没有任何一种血清学方法适合于所有个体或群体的流行病学调查。特别是在对个体进行筛查时，所有的方法都有局限性。血清学检测方法的敏感性和特异性会因检测样本量的不同而有所不同 [7]，因此 3 种方法联合应用，能有效降低出现假阳性和假阴性的概率。上述检测方法均无法区分免疫和感染，因此免疫给布病的检测净化带来了极大困难。